技術(shù)文章
當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章
23
那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡單介紹一下AKTA快速蛋白分離系統(tǒng)和HPLC的優(yōu)劣比較。HPLC優(yōu)點:高壓速度快分析精度高所需樣本量少,主要用于分析純化多肽類缺點:柱子較貴有些需要用乙氰甲醇等有毒有害試劑不能或只能純化很小量的蛋白AKTA系統(tǒng)優(yōu)點:中低壓容易放大可大規(guī)模純化蛋白類常規(guī)只用無機鹽類試劑可配備各種介質(zhì)純化不同蛋白可自己灌膠費用較少缺點:分析精度沒有HPLC高選用HPLC或AKTA的FPLC主要是依據(jù)你的用途而買,分析用HPLC,大規(guī)模純化用FPLCFPLC...
查看更多23
那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡單介紹一下蛋白純化通用問題(二)。7、填料如何儲存?答:請參考說明書。大部分填料可以在4-40℃儲存,不可以冷凍,注意北方的冬天有時候室溫低于零度,運輸和儲存應(yīng)避免凍住。儲存過程中,注意避免填料干掉,或低溫產(chǎn)生氣泡。儲存液:對于耐堿的層析介質(zhì),可以使用0.01MNaOH作為儲存液;對于不耐堿比如親和介質(zhì),一般是用20%的乙醇或2%苯甲醇作為儲存試劑。8、樣品與緩沖液怎么脫氣和過濾?答:溶液和樣品必須過濾(0.2um或者0.45um的濾膜...
查看更多11
那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡單介紹一下蛋白純化通用問題(一)。1、層析柱的壽命多久,可以用多長時間?答:填料的使用次數(shù)依據(jù)不同的目的和條件而有差異。在使用過程中注意操作規(guī)范,定期清潔維護,可以使柱子保持*佳狀態(tài)。2、柱子堵了,超壓如何處理?答:可能原因:緩沖液或樣品未進行過濾、蛋白沉淀或雜質(zhì)殘留、清洗不及時等引起層析柱濾膜堵塞;流速過快、流動相粘度(如乙醇等)過高、溫度過低。建議處理方法:首先將柱子卸下來,確定是系統(tǒng)還是柱子堵了。如果是柱子堵了:參考說明書CIP操...
查看更多11
那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡單介紹一下三種紫外吸收法測蛋白質(zhì)含量。1.280nm的光吸收法因蛋白質(zhì)分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸在280nm處具有**大吸收,且各種蛋白質(zhì)的這三種氨基酸的含量差別不大,因此測定蛋白質(zhì)溶液在280nm處的吸光度值是**常用的紫外吸收法。測定時,將待測蛋白質(zhì)溶液倒入石英比色皿中,用配制蛋白質(zhì)溶液的溶劑(水或緩沖液)作空白對照,在紫外分光度計上直接讀取280nm的吸光度值a280。蛋白質(zhì)濃度可控制在0.1~1.0mg/ml左右。通常用1...
查看更多19
那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡單介紹一下蛋白質(zhì)純化系統(tǒng)方法經(jīng)典攻略(一):不迷路在結(jié)構(gòu)研究和體外生物化學(xué)分析等很多實驗應(yīng)用中都需要用到純化蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)可以從組織中獲取,亦或更經(jīng)常的是從模式生物中過量表達獲得,如細*菌、酵母或哺乳動物細胞培養(yǎng)等。蛋白質(zhì)純化主要是根據(jù)它們各不相同的物理性質(zhì)來從原料進行分離,其目的就是希望能浪費*少的雜蛋白,獲得*多的功能蛋白質(zhì)。一個好的蛋白質(zhì)的純化過程必須要將其純化工藝步驟優(yōu)化至*少。蛋白質(zhì)純化工藝的建立建立蛋白質(zhì)純化工藝時,*重要的...
查看更多